レンチウイルス濃度及び構造

レンチウイルスのサンプルは非常に複雑で、分析が困難です。このため、精製工程に至るまでのクルードサンプルにおいて、バッチの品質を迅速かつ容易にモニタリングする方法は、プロセス開発の大きな課題となっています。その上、レンチウイルスベースの治療薬の分析と製品の特性解析の必要性がますます注目されているため、レンチウイルスバッチの中身を正確に把握することがこれまで以上に重要になっています。

既存のレンチウイルス分析法では、クルードサンプルを特性評価する能力に限界があり、正確なレンチウイルスの力価の決定、RNAの有無の確認、初期段階のサンプルにおける凝集のモニタリングは不可能です。例えば、p24 ELISAは物理的なレンチウイルス濃度を測定する最も一般的な方法であり、qPCRはゲノム濃度を提供しますが、どちらの技術もウイルスの構造部分（キャプシドまたはRNA）にのみ焦点を当てており、また、高レベルの細胞汚染物質や可溶性p24を含む未精製のサンプルを扱うことはできません。また、これらのアッセイ法では、調製されたサンプルに含まれるp24とRNAの大まかな量はわかりますが、それらが実際にウイルスの形を形成しているかどうかについての手がかりは得られません。

非特異的粒子分析に基づく技術は、物理的なレンチウイルス濃度測定のためのELISAに代わる方法を提供します。これらのプラットフォームは、個々の粒子を検出してカウントすることができますが、内部や表面に何があるかを直接確認することなく、粒子の状態と含有量を推測するにすぎません。