脂質ナノ粒子の封入効率
課題
ナノ粒子の特性評価において、ナノ粒子の内側と外側にあるRNAペイロードを測定する蛍光によるカプセル化効率（EE%）アッセイは、非常に骨の折れる作業です。
古典的な蛍光色素ベースのアッセイは、手作業の工程が非常に多く、一度に測定できるサンプル数も少なく、最適化が難しく、再現性にも問題があり、有毒な界面活性剤の使用によって大きな負担となります。
その他の手法では通常、1つのLNPサンプルのカプセル化効率（EE%）を測定するために、2つの前処理サンプルが必要です。まず、ナノ粒子が壊れていない状態で、溶液中に存在する遊離RNAの量を測定します。蛍光色素はナノ粒子内部には入り込めないため、この最初の測定では、溶液中に自由に存在するRNAのみが検出されます。次に、界面活性剤を加えてナノ粒子を破壊し、RNA濃度を再び測定します。これが総RNA濃度となります。
96ウェルプレートでは、このアッセイで通常、複製ありで最大12サンプルまで処理できます。残りのウェルは、ブランクや、界面活性剤あり／なしの各前処理に対する複数のキャリブレーションカーブで占められます。1枚のプレートにつき、ピペッティング操作は266回以上にのぼり、熟練した技術者でも完了までに1時間以上かかります。しかもこれは、LNP特性評価の中でもEE%測定のパートだけの作業です。
ソリューション
これまでになく簡単な封入効率の測定
Stunner AFは、UV/Vis・蛍光・RADLSを組み合わせた独自のシステムにより、ナノ粒子特性評価において迷う余地のない選択肢です。最適な製剤条件を探しているときも、複数バッチの製造品質を確認したいときも、Stunner AFの高スループットが力を発揮します。1枚のプレートで最大44サンプルの測定が可能です。
実証
これまでになく簡単なカプセル化効率（EE%）測定
総RNA量は、2 µLのLNPサンプルからUV/Visで読み取られ、希釈、試薬、界面活性剤、色素、標準物質は一切不要です。遊離RNAは隣接するウェルで測定され、シンプルなマスターミックス希釈ステップだけでローディングできます。
記録的スピードで実現するLNPのフル特性評価
Stunner AFは、UV/Vis・蛍光・RADLSを組み合わせた独自のシステムにより、ナノ粒子特性評価において迷う余地のない選択肢です。最適な製剤条件を探しているときも、複数バッチの製造品質を確認したいときも、Stunner AFの高スループットが力を発揮します。1枚のプレートで最大44サンプルの測定が可能。複数のプレートを使えばさらにスループットを向上させることもできます。Stunner AFは、従来法のほんの一部の作業で、LNP 1プレート分を約1時間で特性評価し、さらにサイズと凝集のデータも同一アッセイ内で取得できます。
Stunner
Stunnerは、UV/Vis濃度測定と回転角動的光散乱（RADLS）を、同じ2μLのサンプルで同時に実行できる唯一のシステムです。Stunner AF（Add Fluorescence）によって色素ベースの蛍光測定を追加すれば、同じランでさらに多くの情報を取得できます。サイズ、カプセル化効率（EE%）、粒子濃度、凝集体の検出といった、LNP（脂質ナノ粒子）の品質指標を一度に網羅して、品質を確実に評価できます。テンポを崩すことなく、あなたのナノ粒子が使用に適しているかどうかを即座に確認できます。
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