クリーンアップ&濃縮

課題

脂質ナノ粒子(LNP)が形成された後、薬物の封入とLNPの完全性を維持するために、エタノールなどの有機溶媒を迅速に除去する必要があります。透析がよく用いられますが、時間がかかり、サンプル量を減らすために二次濃縮のステップが必要となります。

ソリューション

Unagiは、完全性を損なうことなく、LNPのクリーンアップ、濃縮、交換に必要なすべての手間のかかる実践的なステップをまとめた初のベンチトップ型バッファー交換プラットフォームです限外濾過法/ダイアフィルトレーション(UF/DF)を用いて、0.5~8mLの開始容量から1~8サンプルを交換することができます。Unagiは、実行中のサンプル量を注意深く追跡し、サンプルをろ過し、各サンプルに追加する量を正確に把握することができます。各サンプルがターゲットの交換率または濃度に達するまで、このプロセスを繰り返すことができます。

The secret sauce

UnagiはUnaという消耗品を使用します。各Unaには0.5~8mLのサンプルが入り、1回の分析で1~8個のUnaが処理されます。再生セルロース膜(分子量10、30、100 kDa MWCO)を使用しているため、サンプルはよく保持され、液体は吸収されずに通過することができます。また、液体の回収率は≥96%を誇ります。

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Big TunaはLNPの迅速なクリーンアップ、濃縮、交換のために、限外濾過法/ダイアフィルトレーション(UF/DF)を使用してスループットを向上させる完全自動化バッファー交換システムです。稼働中のサンプル量をモニターし、ろ過された量を戻し、毎回適切な比率の交換と濃縮を行うことができます。LNPの有機溶媒は通常急速に流れますが、Big Tunaは適切な調整を行う能力を備えているので、ウェルが枯渇することはありません。

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Big Tunaでは、Unfilterというプレートベースの消耗品を使用しています。すべてのUnfilterは再生セルロース膜を使用しており、非特異的結合を最小限に抑えることができるため、タンパク質に最適です。24ウェル(0.45~8mL)と96ウェル(100~450μL)の2種類があります。Unfilter96は、3、10、30、100kDaの分子量カットオフ(MWCO)に対応し、Unfilter24は10、30、100kDaのMWCOに対応できます。24ウェル、100kDaのUnfilterは、大量のLNPサンプルを高速で処理するのに最適です。

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実証

Unagiのバッファー交換および濃縮パラメータは、サンプルの完全性を保ちながら、高いサンプル回収率を達成するために最適化することができます。LNPサンプル準備において、サイズ変化や薬物封入効率のようなサンプルの品質を犠牲にする必要なく、手間を節約することができます。

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Big Tunaは、ペイロードの薬物封入を維持しながらナノ粒子の濃縮とクリーンアップを行うことができます。典型的なナノ粒子の濃縮とクリーンアップでしたら、準備時間は30分未満で、ランは最短90分で終了できます。

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Unagi

バッファー交換と濃縮は、少量のサンプルであっても必ず行わなければならない煩雑な作業です。時間がかかり、目を離せず、終わったと思ったらまた微調整をしなければなりません。Unagiを使えば、ラボに張り付くことなく、ランの間は他の場所で作業することができます。

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Big Tuna

Big Tunaは煩わしいバッファー交換・濃縮作業を完全自動化し、タンパク質、AAV、LLP、VLP、VLPなどの遺伝子治療ベクターの調製、濃縮、クリーンアップのための交換をわずか30分のセットアップ時間で開始することができます。サンプルの準備にかかる時間と手間を省き、他の重要な作業に専念することができます。

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