限外ろ過/ダイアフィルトレーション（UF/DF）
生体分子の精製及び濃縮、バッファー交換など
次工程前の準備
限外ろ過（UF）とダイアフィルトレーション（DF）は、タンパク質、抗体、核酸などのバイオ医薬品をはじめ、ウイルスまたは脂質ナノ粒子（LNP）送達に依存する治療薬の開発や製造に不可欠です。サンプルの洗浄、精製、濃縮、バッファー交換、脱塩を可能にして、標的分子を次の処理工程に備えるために個別に、あるいは組み合わせて使用することができます。どちらもメンブレンフィルターを使用しますが、操作方法は若干異なります。
限外ろ過とダイアフィルトレーションの違い
UFは半透膜を使用してサイズに基づいて分子を分離し、通常、精製と濃縮に使用されます。DFは、UFの後に別のバッファーや溶媒を加えるプロセスです。
以下はその仕組みとなります。
加圧
UFは半透膜を使用し、ろ過を促進するために力を加えます。一般的には、遠心分離や圧力で実現します。
分子サイズ
半透膜は、より大きな標的分子を保持する一方で、より小さな分子はろ過します。再生セルロースとポリエーテルスルホン（PES）膜は、その親水性特性、低タンパク質結合性、広いpH範囲での適合性から、遺伝子治療や生物学的製剤分野でよく採用されています。
バッファーの交換
一方、DFは、新しいバッファーを加えることによってバッファーを交換します。バッファーは交換されると、サンプルは元の量に戻ります。この時点で、UF/DFサイクルは、サンプルが新しいバッファーで目標交換レベルに達するまで繰り返すことができます。
Unagi
バッファー交換と濃縮は、次の工程に移る前に行わなければならない最も煩わしい作業です。少量のサンプルであっても、時間がかかり、目を離してはならず、終わったと思ったらまた微調整をしなければならないのです。Unagiは、ハンズフリーのベンチトップ型バッファー交換ソリューションで、実験台に釘付けにされることなく、他の場所で作業することができます。
Big Tuna
Big Tunaは完全に自動化されたプレートベースのバッファー交換プラットフォームで、進化したUF/DF法と緩やかなミキシングを利用して、タンパク質、核酸、またはAAVやLNPのような遺伝子治療ベクターをバッファー交換、濃縮、クリーンアップすることができます。サンプルの処理にかける時間と手間を省き、他の重要な作業に専念することができます。
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